Use of Rifampicin in T7 RNA Polymerase-Driven Expression of a Plant Enzyme. Rifampicin Improves Yield and Assembly.
| Autoři | |
|---|---|
| Rok publikování | 1999 |
| Druh | Článek v odborném periodiku |
| Časopis / Zdroj | Protein Expression and Purification |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Genetika a molekulární biologie |
| Klíčová slova | rifampicin - protein expression - T7 RNA polymerase - beta-glucosidase |
| Popis | Expresní systémy založené na vysoké selektivitě a aktivitě T7 RNA polymerázy a přítomnosti silného T7 promotoru se běžně využívají při klonování a expresi rekombinantních proteinů v Escherichia coli. V případě, že exprese není směrována do periplazmy, konečný výtěžek a kvalita syntetizovaného proteinu závisejí na velikosti a primární sekvenci proteinu, jeho rozpustnosti v cytoplazmě včetně jeho schopnosti poskládat se za daných podmínek do terciární či kvartérní struktury. V T7 RNA polymerázovém/promotorovém systému může být tento výtěžek zvýšen použitím rifampicinu a tato práce jeho užitečnost v tomto směru detailně popisuje na příkladu exprese rostlinné cytokinin-specifické betaglukozidázy. Antibiotikum nejen zvyžuje výtěžek její exprese, ale také usnadňuje konečné uspořádání proteinových podjednotek do katalyticky aktivní dimerní formy. |
| Související projekty: |