Varianta v genu CYCS způsobující trombocytopenii 4 zvyšuje kaspázovou aktivitu.

• Autoři: ŠTIKA Jiří; VRZALOVÁ Zuzana; STAŇO KOZUBÍK Kateřina; PEŠOVÁ Michaela; PALUŠOVÁ Veronika; DOSTÁLOVÁ Lenka; BLAHÁKOVÁ Ivona; RADOVÁ Lenka; SEDLÁKOVÁ Petra; SONNEK Radim; ŠMÍDA Michal; POSPÍŠILOVÁ Šárka; DOUBEK Michael
• Rok publikování: 2023
• Druh: Konferenční abstrakty
• Fakulta / Pracoviště MU: Středoevropský technologický institut

Přiložené soubory

• Novy_dokument_Stika.pdf

• Popis: Vrozené trombocytopenie jsou heterogenní skupinou vzácných onemocnění. Vznikají v důsledku genetických variant ve více než 40 genech účastnících se megakaryopoézy a trombopoézy včetně genu CYCS kódujícího cytochrom c (Cysc). Cysc se rovněž účastní buněčného dýchání a aktivace kaspáz, a tím iniciace apoptózy. Doposud bylo popsáno šest různých variant vv genu CYCS způsobujících mírnou formu onemocnění - trombocyxtopenii typu 4. Zde uvádíme variantu NP_061820.1:p(Thr2%Ile) v genu CYCS identifikovanou celoexonovým sekvenováním a její funkční dopad. Varianta segreguje s trombocytopenií ve třech generacích u čtyř členů české rodiny. Pomocí technologie CRISPR/Cas9 byl u lidské megakaryoblastické buněčné linie MEG-01 gen CYCS geneticky modifikován na identifikovanou variantu p.(Thr20Ile). Následně byl sledován vliv na 1) expresi Cycs genu metodou western blot a na 2) mitochondriální aktivitu pomocí testu XFp Cell Mito Stress Test Kit na přístroji Seahorse, 3) aktivaci kaspáz metodou založenou na luminiscenci a průtokovou cytometrii (FCM), 4) expresi povrchových antigenů (FCM) a 5) ploidií (FCM).

Související projekty

• Vyhledávání a funkční testování variant genů predisponujících k familiárním onemocněním krvetvorby
• Národní ústav pro výzkum rakoviny
• Nové přístupy ve výzkumu, diagnostice a terapii hematologických malignit X