| Popis |
Dibenzocyklo[a,c]oktadienové lignany jsou unikátní přírodní sloučeniny, které se vyskytijí téměř výhradně v čeledi Schisandraceae, vývojově nejstarší čeledi dvouděložných rostlin. Plody Schisandra chinensis, které obsahují přibližně 1 % lignanů, se používají po staletí v tradiční čínské medicíně především jako tonikum a antitusikum. V současnosti je věnována pozornost zejména jejich antioxidační a hepatoprotektivní aktivitě1. Některé z nich inhibují replikaci viru HIV v netoxických koncentracích2. V naší práci jsme optimalizovali metodu kvantitativního stanovení lignanů v in vitro kulturách S. chinensis pomocí HPLC. Vzorky S. chinensis jsme extrahovali methanolem, lignany jsme zakoncentrovali extrakcí pomocí pevné fáze (SFE) na kolonkách Strata C18-E (100 mg/1 ml, Phenomenex) a analyzovali na koloně Chromolith Performance RP-18e 100-4,6 (Merck). xtractim Schisan Dibenzocyklo[a,c]oktadienové lignany nejsou komerčně dostupné. Využití rostlin k izolaci lignanů je limitováno. Rovněž obsah lignanů v plodech je nízký (~1 %) a tvořen velkým počtem jednotlivých lignanů, jejichž obsah značně kolísá. Využití tkáňových kultur S. chinensis, může překonat tyto problémy. Stanovili jsme množství 5 hlavních lignanů ve vzorcích v tkáňové kultury S. chinensis pomocí HPLC. Obsah lignanů ve vzorcích tkáňové kultury S. chinensis se nám podařilo zvýšit oproti výchozím hodnotám více jak stokrát (0,001 - 0,42 % suché hmotnosti). Množství 5 hlavních lignanů ve vzorku tkáňové kultury, ve kterém jsme zjistli nejvyšší koncentraci lignanů (0,42 %), bylo vyšší než v listech (0,2 %), ale nižší než v semenech (1,6 %). Zatímco hlavním lignanem semen je schizandrin (0,64 %), ve vzorcích tkáňových kultur byl vždy obsah gomisinu A (max. 0,20 %) a deoxyschizandrinu (max. 0,11 %) vyšší než schizandrinu (max. 0,08 %). Nejvyšší zjištěný obsah gomisinu A v tkáňové kultuře S. chinensis (0,20 %) se tak vyrovnal jeho koncentraci v semenech (0,19 %). Další zvýšení produkce lignanů v tkáňové kultuře bude náplní následujících experimentů.
|
