Study of Fluorescently Labelled Peptides and Small Proteins Using Capillary Electrophoresis Combined with Laser Induced Fluorescence and MALDI MS Detection
| Název česky | Studium fluorescenčně značených peptidů a malých proteinů pomocí kapilární elektroforézy s laserem indukovanou detekcí kombinovanou s hmotnostní spektrometrií MALDI. |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2005 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | Collection Symposium Series, Biollogicaly Active Peptides |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| www | http://www.uochb.cas.cz/Symposia/BAPIX/ |
| Obor | Analytická chemie, separace |
| Klíčová slova | Derivatization; Fluorescent labelling; Capillary Electrophoresis; MALDI Mass Spectrometry; Peptides and Proteins |
| Popis | V této práci aplikujeme metody CELIF, CEUV a CE-MALDITOF MS pro analýzu modelových peptidů a proteinů derivatizovaných fluorescenčními barvivy založenými na rhodaminu. Fluorescence připravených rhodaminových derivátů je excitovatelná snadno dostupným pevnolátkovým laserem - diodově pumpovaným Nd:YAG s dvojitě násobenou frekvencí a vlnovou délkou 532 nm. Laserem indukovaná fluorescenční detekce umožňuje velmi citlivé stanovení látek. Podmínkou aplikovatelnosti metody je však dobrá optimalizace celého postupu derivatizace a spolehlivá identifikace elektroferogramu z metody CELIF nebo CEUV. K tomuto účelu je využito laboatorně sestavená konstrukce pro kombinaci CE s hmotnostně spektrometrickou detekcí MALDITOF. V práci jsou na separacích derivatizovaných směsí peptidů a malých proteinů demonstrovány možnosti derivatizace pro 532 nm LIF detektor, a je diskutována citlivost stanovení reálných analytů včetně porovnání s metodou CE bez použití derivatizace a LIF detekce. |
| Související projekty: |