Kombinace metody EMMA s technikou dávkování z krátkého konce kapiláry
Autoři | |
---|---|
Rok publikování | 2006 |
Druh | Článek ve sborníku |
Konference | Proceeding of 15th International Conference "Chromatographic Methods and Human Health" |
Fakulta / Pracoviště MU | |
Citace | |
Obor | Biochemie |
Klíčová slova | EMMA; short end injection; |
Popis | Před čtrnácti lety Bao a Reginer vyvinuli novou metodu sledování enzymatických reakcí pomocí kapilární elektroforézy (1). U této metody, kterou nazvali Electrophoretically Mediated Microanalysis (EMMA, elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza), je kapilára využita nejen k separaci, ale i jako reakční prostředí pro vlastní enzymovou reakci. Od svého objevu byla metoda EMMA použita na studium celé řady enzymových i neenzymových systémů (2-4). V této práci je demonstrována možnost kombinace metody EMMA s technikou dávkování z krátkého konce kapiláry, což je technika vyvinutá Altriou a spol. pro dosažení kratších separačních časů v kapilarní elektroforéze (5). Tato kombinace si přitom zachovává výhody obou těchto instrumentálních přístupů. Zatímco dávkování z krátkého konce kapiláry zkracuje dobu analýzy a zvyšuje její citlivost, metoda EMMA umožňuje její plnou automatizaci a přináší značné snížení spotřeby enzymového preparátu a substrátů, což bylo dokumentováno na kinetických studiích enzymů haloalkandehalogenasy (jednosusbtrátová enzymová reakce) a rhodanasy (dvoususbtrátová enzymová reakce). |
Související projekty: |