Microreaction in CE for drug metabolism studies (Lecture)
| Název česky | Mikroreakce v CE pro studium metabolismu léčiv (Přednáška) |
|---|---|
| Autoři | |
| Rok publikování | 2008 |
| Druh | Článek ve sborníku |
| Konference | Proceeding of 16th International Conference "Analytical Methods and Human Health". |
| Fakulta / Pracoviště MU | |
| Citace | |
| Obor | Biochemie |
| Klíčová slova | drug metabolism; microsomes; on-capillary microreaction; electrophoresis |
| Popis | Studium metabolismu léčiv je důležitou součástí už prvotní fáze vývoje nových léčiv. In vitro testy jsou běžně vyžadovány při hodnocení biotransformace léčiv. Lidské jaterní mikrosomy, všeobecně rozšířený in vitro model, obsahuje především cytochromy P450. Tyto enzymy hrají důležitou roli v první fázi metabolismu xenobiotik zahrnující i vylučování léčiv. Vedle dobře zavedených technik jakými jsou spojení kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie, metody kapilární elektroforézy nabízí možnost přímých automatizovaných analýz při studiu metabolismu léčiv. Reakce a konečná separace se mohou uskutečnit v jedné kapiláře současně, nebo následně. Elektroforeticky zprostředkovaná mikroanalýza (EMMA) je ceněnou metodou pro enzymatické mikroreakce. V kombinaci s metodou částečného plnění EMMA poskytuje široké možnosti aplikace a zvládnutí odlišností enzymatických systémů. Nadávkování jednotlivých reaktantů ve vhodném pořadí a množství umožňuje generovat metabolity on-line způsobem za ideálních reakčních podmínek. Metabolismus léčiv byl studován pomocí mikrosomů a dextrometorfanu, susbstrátu. Isoformy cytochromu P450, které se nejvýzmnaměji podílejí na transformaci jsou isoforma 3A4 a 2D6 za vzniku 3-methoxymorfinanu, 3-hydroxymorfinanu a dextrorfanu. Testovací reakce byly provedeny v křemenné kapilářepři 37C následované důsledným promytím po každé analýze. Záklasní elektrolyt se skládal z tetraborátovéh opufru, lineárního polyakrylamidu potlačujícího elektroosmotický tok a 2-propanolu měnícího selektivitu separace. Optimalizované parametry metody částečného plnění (pořadí dávkovaných látek a podmínky dávkování)byly využity pro sledování metabolismu léčiva. Prezentovaná EMMA metoda by mohla být začleněna pro předběžné studie první fáze testováné nových léčiv. Toto studium biotransformace by mohlo napomoci při testování nových potencionálních léčiv, kdy není potřeba radioaktivně značených látek a spotřeba vzorku a jeho nároky na předúpravu jsou minimální. To přináší výhodu přísunu velkého množství dat a snížení provozních nákladů. |
| Související projekty: |